多数微生物(除微球菌属外)在低温时对紫外线辐射是很敏感的, 因为在此条件下, 胸腺嘧啶二聚体的数量明显减少,胸腺嘧啶光产物的累积将影响微生物的修复; 而且温度变化还影响UVLED的强度。温度过高或过低均会影响消毒效果, 一般温度以20～ 40 ℃为宜, 也有人认为以10～ 25 ℃为宜。 

    湿度对紫外线杀菌的影响尚无一致看法。相对湿度在60%～ 70%以上,微生物的杀灭率急剧下降, 最适为40%～ 60% ,超过80% 甚至反有激活作用。相对湿度由33% 增至56% 时, 杀菌效能可减少到原有的1.3。 由于相对湿度高, 使空气中颗粒增大, 在采样时易于捕获, 使杀菌效果呈表面上降低。相对湿度60%～ 70% 时, 空气中细菌含水为30 g.100 g 菌体, 此量称临界含水量。所以当湿度高过960%-70%时，紫外线杀菌效率较低。

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